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蛋白酶K是一种内切蛋白酶,可在脂肪族、芳香族或疏水性氨基酸的羧基侧切割肽键。蛋白酶K属于丝氨酸蛋白酶。要水解的最小肽是四肽。
用于DNA检测和基因分型的DNA提取裂解试剂:当处理少量生物样品时,蛋白酶K溶液很有用。向DirectPCR试剂中添加最终浓度为0.5-1.0 mg/ml的酶溶液(每1mL DirectPCR试剂中添加25-50μl蛋白酶K溶液)。对于每种血液、血迹、颊拭子、发根DNA基因分型,请遵循DirectPCR试剂方案/手册的说明手册。一旦在DirectPCR试剂中稀释,蛋白酶K稳定约24小时。
其他用途:蛋白酶K非常有效地消化天然蛋白质。因此,当从组织或细胞中分离DNA和RNA时,它可以用来去除DNA酶和RNA酶。
使用条件:
•蛋白酶K在广泛的pH范围内具有活性,最佳活性介于6.5和9.5之间
•在变性条件下——例如,在SDS或尿素存在的情况下
•在存在金属螯合剂(如EDTA)的情况下
•在高温下,最佳消化温度为65℃
单位定义:以变性血红蛋白为底物,酶的一个单位在37°C下1分钟内释放福林阳性氨基酸和对应于1μmol酪氨酸的肽。
质量控制:检测是否存在内、外脱氧核糖核酸酶和核糖核酸酶

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